🔍 点击放大检测原理
孔雀石绿快速检测卡应用了竞争抑制免疫层析的原理,样本中的孔雀石绿药物在流动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合,抑制了抗体和 NC 膜检测线(T 线)上的孔雀石绿药物—BSA偶联物的结合,从而导致T线颜色深浅的变化。当样本中没有孔雀石绿药物或孔雀石绿药物浓度低于检测限时,T 线显色强于C 线或与C 线显色无明显差异;当样本中的孔雀石绿药物浓度等于或高于检测限时,T 线显色明显弱于C 线显色或T 线不显色;而无论样本中是否含有孔雀石绿药物,质控线(C 线)都会显色,以示检测有效。
适用范围
本产品适用于水产品(鱼、虾、贝类)组织样本中孔雀石绿的定性检测。
检测限
样本检出限范围:2 mg/kg(ppb)
产品组成
| 检测卡 | ………………… | 20个 | 净化剂 | ………………… | 1瓶 | |
| 提取剂 | ………………… | 1瓶 | 萃取剂 | ………………… | 2瓶 | |
| NaCl溶液 | ………………… | 1瓶 | MG复溶液 | ………………… | 1瓶 | |
| 氧化剂 | ………………… | 1瓶 | 金标微孔 | ………………… | 1桶 | |
| 说明书 | ………………… | 1份 |
注意事项
Ø 请按照操作步骤进行测试,整个实验需佩戴手套进行操作,尽量不要触摸追溯卡中央的白色膜面,检测时避免阳光直射;本检测卡为一次性产品,请勿重复使用。
Ø 本产品检测结果仅供参考,如需确证,请参照国家相关标准方法。
Ø 切记:操作样本前处理期间,勿用蓝、黑记号笔做记号标识操作,因为记号笔中某些成分会干扰孔雀石绿抗原抗体结合,导致假阳性结果。
Ø 加入 NaCl溶液之后放振荡器震荡2min,充分摇匀后再加剩余试剂。加完剩余试剂之后,需要充分摇匀,需要用手上下剧烈摇匀2min完全摇散,摇至样本呈匀浆状方可。(此步骤很重要,如果没摇匀可能会出现无效卡。)
Ø 离心后取第二层清液(上层液体和第二层分层不是特别明显,需要注意下,用1ml枪头插到中间层,缓慢吸取中间层,切勿吸取到下方水层,如果吸到下层需要把液体打回离心管重新离心。)
Ø 吹干后加入复溶液用1ml移液枪反复吹打,把离心管内固体充分复溶下来,(复溶完成后尽快检测,待测液不要放置太久。)
储存及有效期
Ø 储存条件:储存于4~30℃阴凉避光干燥环境中,切勿冷冻。
Ø 有效期:该产品有效期为12个月。
1. 样本前处理
(建议虾要去掉头和壳后彻底清洗干净,贝类要去掉壳后彻底清洗干净,鱼要去鳞后取鱼背部油脂较少的部位进行实验,样本应当避光冷藏保存)
Ø 取切碎的一定量的去脂肪组织样本,用均质机均质(剪刀剪碎);
Ø 称取 3g±0.1g均质物于配套15ml离心管中;
Ø 向上述离心管中加入2ml NaCl溶液,剧烈振荡2min,依次加入提取剂溶液3滴(约150ul),萃取剂溶液4ml,再加入2ml净化剂,拧紧盖帽剧烈振荡2min,室温下4000 r/min 离心3min;
Ø 此时离心管底部为组织样本均质物,向上分为三层清夜,移取中间层清液2ml于5ml离心管中,加入100ul氧化剂,平行轻摇混匀30秒,65℃下,利用氮吹仪或吹风机吹干;
Ø 向吹干的离心管中加入6滴(约0.3ml)MG复溶液,反复吹打1min,充分复溶离心管底部及内壁固体残留物,此溶液为待检样本液。
2. 使用步骤
Ø 将检测卡和待检样本液恢复至室温(20℃-30℃),撕开铝箔袋,取出检测卡。
Ø 用微量移液枪移取120mL待检样本液垂直滴加于金标微孔中,用移液枪轻柔吹打30秒,完全溶解金标微孔底部红色物质,水平静置,等待反应3分钟,吸取金标微孔内红色溶液,轻柔吹打10秒,吸取孵育好的全部待测样本液垂直滴加于加样孔中,反应10分钟进行判读,其他时间判读无效;
3. 根据显色判读
Ø 质控C线颜色比检测T线颜色浅或者相近为阴性;
Ø 检测T线颜色比质控C颜色浅或者不显色为阳性;
Ø质控C线不显色,说明不正确的操作过程或检测卡失效。
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